NEFA Assay Kit este un instrument pentru cuantificarea NEFA

Kit de testare NEFA este un instrument pentru cuantificarea NEFA (Oxid Nitric). Este utilizat pentru a determina concentrația de NEFA în probele de sânge sau de țesut. NEFA este un nutrient vital care este responsabil pentru reglarea metabolismului energetic, excitabilitatea cardiacă, conducerea neuromusculară, tensiunea arterială și coagularea sângelui. Se găsește în principal în oase, mușchi, țesuturi moi și celule roșii din sânge.

Pregătirea

NEFA este o proteină mică, de 50,2 kDa, care are capacitatea de a se lega de ADN. Este un complex de acizi grași sintază (FAS) citosolic de tip I care produce acid palmitic neesterificat. În prezența Acil-CoA oxidazei (ACS), complexul FAS oxidează 3-metil-N-etil-N-(b-hidroxietil)-anilina la 4-aminoantipirină, care este precursorul molecular pentru acetil-CoA. Acest proces este un proces enzimatic crucial pentru toate organismele eucariote.

Deși NEFA poate să nu aibă masa mare a unei grăsimi, este o sursă importantă de combustibil pentru țesuturile periferice. Este metabolizat de ficat și este transportat complexat cu albumină către țesuturile periferice. NEFA este, de asemenea, eliberat de un domeniu de tioesterază (TE) al complexului FAS.

Pipetarea

Trusele ELISA sunt folosite pentru a detecta mici compuși chimici, proteine ​​și peptide. Aceste truse se bazează pe proteine ​​recombinante exprimate în E.coli. Trusele nu conțin azidă, timerosal și alte resurse naturale.

În kit, există reactivi precum BSA, tampon de diluție apirogen și soluție de spălare. Soluția de spălare este stabilă timp de două săptămâni la 2-8°C. Tamponul de diluție conține 0,9% soluție salină fiziologică.

Setul are un standard intern NEFA. Acesta este adăugat cu NEFA la o concentrație care se potrivește cu concentrația așteptată din probă. Absorbanța pigmentului albastru-violet la 546 nm este măsurată pentru a calcula concentrația de NEFA din probă.

Colorimetric

Utilizarea trusei WAKO NEFA a obținut o varietate de rezultate, inclusiv unele care nu au sens. Cu toate acestea, trusa NEFA este un candidat demn atunci când vine vorba de determinarea conținutului relativ de acizi grași din probele de țesut animal. Ca atare, trusa NEFA este unul dintre cele mai populare teste de laborator. Trusa vine cu instrucțiuni pentru testarea diferitelor tipuri de probe, inclusiv sânge, ser, saliva și o varietate de lipide.

Cea mai interesantă parte a trusei este că poate fi folosit pentru a măsura o varietate de acizi grași, inclusiv cei care se găsesc în mod obișnuit în lipide. Trusa vine cu o serie de enzime concepute pentru a detecta o varietate de acizi grași, inclusiv acizii grași C-8 și C-16 găsiți la oameni și animale. Cu toate acestea, trusa nu este recomandată pentru utilizare în concentrații de FFA de înaltă precizie pe o gamă largă.

Electrochimic

NEFA sunt acizi grași importanți în sănătatea umană, dar sunt rar evaluați. În plus, detectarea lor este foarte costisitoare. Prin urmare, monitorizarea modificărilor concentrațiilor acestora poate ajuta la prevenirea și gestionarea mai precisă a bolilor. În acest studiu, a fost dezvoltat un kit de analiză electrochimică pentru NEFA, folosind PDA-MWCNT ca suprafață a senzorului. Acest electrod a prezentat o activitate electrocatalitică bună pentru etapele de oxidare NEFA și ar putea fi utilizat în aplicații reale.

Electrodul enzimatic a constat dintr-un film compozit multistrat de PDA-MWCNT și ACOD, ACS și polimer. Ordinea straturilor a fost aleasă pentru a se potrivi cu ordinea reacției enzimatice. S-a stabilit că ACS și ACOD au rămas biologic active în film.

Concentrația de NEFA în T2D

Concentrațiile de NEFA din sânge au fost studiate în contextul obezității și hipertensiunii arteriale. S-a demonstrat că acești compuși promovează creșterea TA prin stimularea a1-adrenergică și cresc stresul oxidant. NEFA sunt, de asemenea, asociate cu sindromul metabolic. Acești compuși pot fi importanți în dezvoltarea hipertensiunii arteriale.

Au fost propuse mai multe modele pentru a descrie răspunsul NEFA în plasmă la provocarea intravenoasă de glucoză. Modelul Boston a descris cu acuratețe a patra fază a creșterii concentrației de NEFA. Cu toate acestea, modelul nu a descris faza inițială de latență. Modelul Fabian a folosit o pantă exponențială simplă pentru a descrie această fază. În mod similar, modelul Thomaseth nu a putut descrie faza de rebound.

Nivelurile de NEFA în trigliceride

Mai multe studii au investigat efectele chirurgiei bariatrice asupra compoziției NEFA plasmatice. Într-o meta-analiză publicată în 2016, nivelurile serice de NEFA au fost scăzute la 6 și 12 luni după intervenție chirurgicală. Acest lucru se poate datora nivelului redus de insulină. Într-un alt studiu, NEFA-urile plasmatice au fost măsurate la un grup de pacienți obezi înainte și după operația de bypass gastric Roux-en-Y.

Concentrațiile a șapte NEFA au fost scăzute la 9 luni după operație. Linoleatul (un acid gras omega-6) a fost redus cu 18:2, stearat cu 18:0 și oleatul cu 16:0. Cu toate acestea, concentrația de docosahexaenoat nu a fost afectată. NEFA-urile au fost transformate în esteri metilici ai acizilor grași (FAME). Acestea au fost apoi analizate prin cromatografie gazoasă-spectrometrie de masă (GC-MS).